青刺果种子和油粕中的营养成分对比及酚类物质

自由基在人体系统中是必不可少的，适量的自由基可以维持健康和生理平衡；然而，一旦自由基没有及时清除、超出正常范围，就会攻击体内一些正常的重要分子，对一些健康细胞造成损伤，使细胞老化、病变，甚至会增加心血管疾病、神经性退行疾病和癌症等疾病的发病率[1-2]。因此，现在许多研究都致力于寻找天然抗氧化剂来清除体内过量的自由基。

青刺果是一种多年生的木本油料植物，大多数生长在中国和北印度高原地区，属于特色经济作物，也是被广泛使用的一种食疗药物。其解毒、抗炎的特性，可缓解肛门及牙龈相关的疾病。此外，青刺果的嫩茎和叶都可以食用，一些少数民族还将青刺果视为“吉祥物”或“花之王”[3]。由于青刺果的种子经常被用来榨油，因此，目前青刺果的相关报道主要集中在对其果油的研究。青刺果油在市场上已经开始大规模生产及销售，食用青刺果果油能减轻肌肉和身体疼痛，并能够预防一些疾病的发生[4]，所以青刺果正逐渐引起我们的重视。但目前对青刺果种子的研究仍然较少，特别是对其营养成分、酚类物质组成及含量和抗氧化活性等方面的研究仍不够全面。油粕是种子提取油后的副产品，少有人关注，目前报道的只有青刺果油粕提取物抗菌作用的研究[5]，而关于青刺果油粕的营养成分等相关研究未见报道，这严重限制了青刺果的开发与综合利用。

因此，本研究的目的是评估和比较青刺果种子和油粕中的营养物质、酚类成分和以及抗氧化活性，为青刺果的进一步研究和发展成为功能食品或保健品提供一定的相关数据和应用基础。

1 材料与方法

1.1材料与试剂

青刺果的种子，购买于云南省丽江市；油粕，购自当地榨油厂。Folin Ciocalteu试剂购自默克(Darmstadt，德国)；2,2 -二苯基-1-三硝基苯肼(DPPH)、2′-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、三氯乙酸(TCA)均购自Sigma(Sigma-Aldrich，上海，中国)；标准氨基酸溶液均在Wako公司(日本)购买；本研究中使用的所有标准品均购自成都曼斯特生物科技有限公司(成都，中国)；所用的其他化学品和溶剂均为分析纯。

1.2原料前处理

将买来的种子和油粕冻干、粉碎，放于-20 ℃储存，以便后续进一步进行营养成分的检测。取5 g干燥后的种子和油粕干粉分别加入25 mL的80%甲醇，利用超声辅助提取30 min，然后过滤取上清；在相同条件下再重复提取2次，以确保充分提取。合并滤液，用旋转蒸发仪除去有机溶剂并浓缩，浓缩液冻干放于-20 ℃保存，用以后续总酚和总黄酮含量的测定、酚类成分分析和清除DPPH和ABTS自由基能力的实验。

1.3总酚含量测定

用福林酚法[6]测定青刺果种子和油粕中的的总酚含量。分别取种子和油粕提取物10 mg溶于5 mL 80%甲醇作为样品溶液。然后取0.5 mL样品溶液，加入0.25 mL的福林酚试剂，静置几分钟。随后加入0.75 mL 质量浓度为200 g/L 的Na2CO3溶液，并用蒸馏水定容至5 mL。混匀后，在70 ℃水浴中孵育10 min。随后用酶标仪测定其在765 nm处的吸光值。总酚的标准曲线是以没食子酸为当量，将没食子酸稀释成5个浓度，按照以上步骤，测定反应后的吸光值并绘制标准曲线。

1.4总黄酮含量测定

青刺果种子和油粕中总黄酮的测定方法是参照以往报道的文献并进行了细微的改动[7]。分别取种子和油粕提取物10 mg溶于20 mL 80%(体积分数)的甲醇制成样品溶液，然后取制好的样品溶液0.5 mL，先后加入2.5 mL 70% 的乙醇，0.15 mL 5% 的NaNO2以及0.15 mL 10% 的Al(NO3)3。6 min后，加入1 mL 1 mol/L的NaOH，最后加入70% 的乙醇使反应液总体积达到5 mL。混匀，室温反应30 min，用酶标仪测定500 nm处的吸光值。总黄酮的标准曲线是用芦丁作为参照物，将芦丁稀释成5个不同浓度，按照以上步骤测定并绘制标准曲线。

1.5营养物质分析

1.5.1 基本营养物质组分分析

基本营养物质组分的分析包括对青刺果种子及油粕中粗脂肪、粗蛋白和粗纤维含量的测定。参照AOAC中的方法960.39[8]测定粗脂肪含量；粗蛋白含量按照AOAC中的方法976.05[9]测定；总膳食纤维和可溶性膳食纤维按照AOAC方法985.29和AOAC方法993.19进行测定[10-11]。

1.5.2 氨基酸成分分析

参照KIM等的方法[12]对游离氨基酸进行分析。即分别取0.1 g的种子和油粕加入10 mL 5%(体积分数)的三氯乙酸(TCA)。在室温放置1 h，然后以转速n=10 000 r/min离心10 min，收集上清液，用0.45 μm的滤头过滤，滤液用于游离氨基酸分析。样品经过110 ℃、6 mol/L HCl的条件进行氨基酸水解，处理24 h后，在L-8900高速氨基酸分析仪(Hitachi，日本)进行分析，以5% 的乙醇和茚三酮溶液为流动相，游离氨基酸和水解氨基酸分别用# 2622 SC-PF和# 2622 SC-PH两种柱子进行分析。

文章来源：《种子科技》 网址: http://www.zzkjzz.cn/qikandaodu/2021/0427/1292.html